کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
11019561 | 1717633 | 2019 | 27 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Biochemical characterization of chitinase A from Bacillus licheniformis DSM8785 expressed in Pichia pastoris KM71H
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
BMMYTetra-N-acetylchitotetraoseDNSDeglycosylationBMGYTLCPBS3,5-dinitrosalicylic acid - اسید 3،5-دینیتروسالتیسیلیکSDS-PAGE - الکتروفورز ژل پلی آکریل آمیدSodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل پلی اتیل آمید سدیم دودسیل سولفاتbuffered methanol-complex medium - بافر متانول پیچیده محیطEnzymatic assay - تست آنزیمیPhosphate buffered saline - فسفات بافر شورminimal medium - متوسط متوسطbuffered glycerol-complex medium - محیط پیچیده گلیسرول بافرN-acetylglucosamine - نیتستیگلوکوزامینMolecular cloning - همسانه سازی مولکولی، کلونینگ مولکولیpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازthin-layer chromatography - کروماتوگرافی نازک لایه
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شیمی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Chitin is an abundant biopolymer found mainly in the exoskeleton of crustaceans and insects. The degradation of chitin using chitinases is one way to address the accumulation of chitin waste streams in the environment, and research has therefore focused on the identification, improvement and expression of suitable enzymes. Here we describe the production, purification and characterization of Bacillus licheniformis chitinase A in the Pichia pastoris expression system. Optimal enzyme activity occurred at pH 4.0-5.0 and within the temperature range 50-60â¯Â°C. With colloidal chitin as the substrate, the Km (2.307â¯mM) and Vmax (0.024â¯mMâ¯minâ1) of the enzyme were determined using a 3,5-dinitrosalicylic acid assay. The degradation products of colloidal chitin and hexa-N-acetylchitohexaose were compared by thin-layer chromatography. The activity of the glycosylated enzyme produced in P. pastoris was compared with the in vitro deglycosylated and aglycosylated version produced in Escherichia coli. We showed that the glycosylated chitinase was more active than the deglycosylated and aglycosylated variants.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Protein Expression and Purification - Volume 154, February 2019, Pages 25-32
Journal: Protein Expression and Purification - Volume 154, February 2019, Pages 25-32
نویسندگان
Gheorghita Menghiu, Vasile Ostafe, Radivoje Prodanovic, Rainer Fischer, Raluca Ostafe,