کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
5914982 | 1162766 | 2010 | 13 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Modulation of G-protein coupled receptor sample quality by modified cell-free expression protocols: A case study of the human endothelin A receptor
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
CHSGPCRET-1TDMETAETBkDaPEIIMACn-dodecylphosphocholineTX-100IC50Brij-35PVDFLPPGDDMTMSSECHDMCMCfeeding mixtureSDSLMPGLMPCnuclear magnetic resonance - رزونانس مغناطیسی هستهای1-palmitoyl-2-hydroxy-sn-glycero-3-[phospho-rac-(1-glycerol)] - 1-پالمیتویل-2-هیدروکسی اسل-گلیسرو -3- [فسفوریک- (1-گلیسرول)]50% inhibitory concentration - 50٪ غلظت مهاریG-protein coupled receptor - G-پروتئین همراه گیرندهG-protein coupled receptors - G-پروتئین گیرنده های متصل شدهn-Dodecyl-β-D-maltoside - n-Dodecyl-β-D-مالتوزیدSDS–PAGE - SDS-PAGEtris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride - tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochlorideAgonist binding - اتصال آگونیستSDS–polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل SDS-polyacrylamide gelendothelin A receptor - اندوتلین گیرندهendothelin-1 - اندوتلین-1transmembrane segment - بخش غشاییCell-free - بدون سلولCell-free expression - بیان سلولی آزادTriton X-100 - تریتون X-100 NMR - تشدید مغناطیسی هستهای Solubilization - حلال سازیpolyvinylidene difluoride - دی فلوئورید پلی وینیلیدینcircular dichroism - رنگ تابی دورانیTCEP - ساکتcolumn volume - ستون حجمsodium dodecylsulphate - سدیم دودسیل سولفاتCritical micellar concentration - غلظت میکرولیکی بحرانیMALS - مالشreaction mixture - مخلوط واکنشpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازMolecular weight - وزن مولکولیMulti angle light scattering - پراکندگی نور چند زاویهMembrane protein - پروتئین غشائیpolyethyleneimine - پلی اتیلنیمینCHAPS - چاپسSize exclusion chromatography - کروماتوگرافی اندازهای طردیimmobilized metal affinity chromatography - کروماتوگرافی وابسته به فلز متمرکزendothelin B receptor - گیرنده اندوتلین B
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شناسی مولکولی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
G-protein coupled receptors still represent one of the most challenging targets in membrane protein research. Here we present a strategic approach for the cell-free synthesis of these complex membrane proteins exemplified by the preparative scale production of the human endothelin A receptor. The versatility of the cell-free expression system was used to modulate sample quality by alteration of detergents hence presenting different solubilization environments to the synthesized protein at different stages of the production process. Sample properties after co-translational and post-translational solubilization have been analysed by evaluation of homogeneity, protein stability and receptor ligand binding competence. This is a first quality evaluation of a membrane protein obtained in two different cell-free expression modes and we demonstrate that both can be used for the production of ligand-binding competent endothelin A receptor in quantities sufficient for structural approaches. The presented strategy of cell-free expression protocol development could serve as basic guideline for the production of related receptors in similar systems.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Structural Biology - Volume 172, Issue 1, October 2010, Pages 94-106
Journal: Journal of Structural Biology - Volume 172, Issue 1, October 2010, Pages 94-106
نویسندگان
Friederike Junge, Laura M. Luh, Davide Proverbio, Birgit Schäfer, Rupert Abele, Michael Beyermann, Volker Dötsch, Frank Bernhard,