کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
602792 | 879994 | 2007 | 7 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
An optimized assay for transcription factor NF-κB with dsDNA-coupled microplate
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
NF-κBphorbol 12-myristate 13-acetateAP-1ssDNASSCpNPPDTTDBPNP-40HEPESdsDNANonidet-P40SDSPBSBSA - BSASingle-stranded DNA - DNA تک رشته ایdouble-stranded DNA - DNA رشته ایDNA - DNA یا اسید دزوکسی ریبونوکلئیکPMA - LDC هاN-2-hydroxyethylpiperazine-N′-2-ethanesulfonic acid - N-2-hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acidp-nitrophenylphosphate - p-نیترفنیل فسفاتSp1 - SP1Electrophoretic mobility shift assay - آزمون تحرک تحرک الکتروفورزbovine serum albumin - آلبومین سرم گاوAlkaline phosphatase - آلکالین فسفاتاز یا فسفاتاز قلیاییEDTA - اتیلن دی آمین تترا استیک اسید Ethylenediaminetetraacetic acid - اتیلینیدامین تتراستیک اسیدdeoxyribonucleic acid - اسید deoxyribonucleicELISA - تست الیزاEnzyme-linked immunosorbent assay - تست الیزاtumor necrosis factor-α - تومور نکروز عامل αdithiothreitol - دیتیوتریتولsodium dodecyl sulfate - سدیم دودسیل سولفاتEMSA یا electrophoretic mobility shift assay - سنجش تغییر تحرک الکتروفورتیکSp1 transcription factor - فاکتور رونویسی Sp1TNF-α - فاکتور نکروز توموری آلفاnuclear factor kappaB - فاکتور هسته ای kappaBPhosphate-buffered saline - محلول نمک فسفات با خاصیت بافریactivator protein-1 - پروتئین فعال کننده-1DNA-binding proteins - پروتئین های اتصال دهنده DNA
موضوعات مرتبط
مهندسی و علوم پایه
مهندسی شیمی
شیمی کلوئیدی و سطحی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
To develop an EMSA-free assay approach for analyzing the sequence-specific DNA-binding proteins (DBPs), an easy cost-effective dsDNA-coupled plate (dcPlate) was developed in our lab for this purpose. In this paper, the assay conditions of such dcPlate were fully optimized for detecting an important transcription factor, NF-κB. The optimized parameters of dcPlate for assay of NF-κB were as follows: immobilized DNA probe at the concentration of 25 pmol/100 μL-well, incubation time of 90 min for NF-κB binding to dcPlate, primary and secondary antibody concentration of 0.1 μL/100 μL dilution, incubation time of 90 min for primary antibody binding to NF-κB, temperature of 25 °C for the above process, colorimetric developing time for 30 min. After optimization, the signal was improved three times higher than that from not optimized conditions. The linear colorimetric detection ranges of the purified recombinant NF-κB p50 and the cell nuclear extract were from 0.59 to 75 ng/well and 0.313 to 10 μg/well, respectively.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces - Volume 55, Issue 1, 15 March 2007, Pages 31-37
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces - Volume 55, Issue 1, 15 March 2007, Pages 31-37
نویسندگان
Jian lin Li, Hong mei Chen, Min li Li, Dong Hua, Zu hong Lu, Jin ke Wang,