کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
10749465 | 1050292 | 2015 | 14 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Optimising methods for the preservation, capture and identification of ubiquitin chains and ubiquitylated proteins by immunoblotting
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
UbDubiquitin-associatedUBADUBMOPSUIMubiquitin-interacting motifPUBPPasePOIIL-1RDeubiquitylaseNEMONZFDMPSDSPVDF2-(N-morpholino) ethane sulfonic acidIAAN-ethylmaleimideGSTHEK3-(N-morpholino) propane sulfonic acidTNFIMACTNF-RImmunoblotting - ایمن سازیImmunoprecipitation - تخریب ایمنیUbiquitin-binding domain - حوزه اتصال پذیری Ubiquitinpolyvinyl difluoride - دیوفوردین پلیوینیلsodium dodecyl sulphate - سدیم دودسیل سولفاتtumour necrosis factor - عامل نکروز تومورIRAK - عراقLUBAC - لوباکTubes - لوله هاNF-κB essential modulator - مدولاتور ضروری NF-κBMeS - مسNEM - نهNitrocellulose - نیترو سلولزRIP - پاره کردنProtein of interest - پروتئین مورد علاقهReceptor interacting protein - پروتئین گیرنده گیرندهpolyubiquitin - پلیوویکیتینImmobilised metal ion affinity chromatography - کروماتوگرافی وابسته به یون فلزی مشتق شدهhuman embryonic kidney - کلیه جنین انسانglutathione S-transferase - گلوتاتیون S-ترانسفرازIL-1 receptor - گیرنده IL-1TNF receptor - گیرنده TNFUbiquitin - یوبیکویتینiodoacetamide - یووداکتامید
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شیمی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Immunoblotting is a powerful technique for the semi-quantitative analysis of ubiquitylation events, and remains the most commonly used method to study this process due to its high specificity, speed, sensitivity and relatively low cost. However, the ubiquitylation of proteins is complex and, when the analysis is performed in an inappropriate manner, it can lead to the misinterpretation of results and to erroneous conclusions being reached. Here we discuss the advantages and disadvantages of the methods currently in use to analyse ubiquitin chains and protein ubiquitylation, and describe the procedures that we have found to be most useful for optimising the quality and reliability of the data that we have generated. We also highlight commonly encountered problems and the pitfalls inherent in some of these methods. Finally, we introduce a set of recommendations to help researchers obtain high quality data, especially those new to the field of ubiquitin signalling. The specific topics addressed in this article include sample preparation, the separation, detection and identification of particular ubiquitin chains by immunoblotting, and the analysis of ubiquitin chain topology through the combined use of ubiquitin-binding proteins and ubiquitin linkage-specific deubiquitylases.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications - Volume 466, Issue 1, 9 October 2015, Pages 1-14
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications - Volume 466, Issue 1, 9 October 2015, Pages 1-14
نویسندگان
Christoph H. Emmerich, Philip Cohen,