Purification and comparison of heat shock protein 90 (Hsp90) in Candida albicans isolates from Malaysian and Iranian patients and infected mice

SummaryObjectiveThe purposes of this study were to purify and compare the concentration ratios of heat shock protein 90 (Hsp90) in clinical isolates of Candida albicans (C. albicans) obtained from Malaysian and Iranian patients and infected mice.Materials and methodsHsp90 was extracted using glass beads and ultracentrifugation from yeast cells and purified by ion exchange chromatography (DEAE-cellulose) and followed by affinity chromatography (hydroxyapatite). Purity of Hsp90 was controlled by SDS-PAGE and its identification was realized by immunoblotting test.ResultsThe graphs of ion exchange and affinity chromatography showed one peak in all C. albicans isolates obtained from both Malaysian and Iranian samples, infected mice and under high-thermal (42 °C) and low-thermal (25 °C) shock. In immunoblotting, the location of Hsp90 fragments was obtained around 47, 75 and 82 kDa. The least average concentration ratios of Hsp90 were 0.350 and 0.240 mg/g for Malaysian and Iranian isolates at 25 °C, respectively, while the highest average concentration ratios of Hsp90 were 3.05 and 2.600 mg/g for Malaysian and Iranian isolates at 42 °C, respectively. There were differences in the ratio amount of Hsp90 between Malaysian isolates (1.01 ± 0.07 mg/g) and mice kidneys (1.23 ± 0.28 mg/g) as well as between Iranian isolates (0.70 ± 0.19 mg/g) and mice kidneys (1.00 ± 0.28 mg/g) (P < 0.05).ConclusionThe results showed differences in all situations tested including Iranian and Malaysian isolates, samples treated with temperatures (25 °C or 42 °C) and before and after infecting the mice (37 °C), indicating higher virulent nature of this yeast species in high temperature in human and animal models.

RésuméObjectifLes buts de cette étude étaient de purifier et de comparer les taux de concentrations de protéine de choc thermique 90 (Hsp90) chez des isolats cliniques de Candida albicans (C. albicans) obtenus de patients malaisiens et iraniens et de souris infectées.Matériel et méthodesHsp90 a été extraite en utilisant des billes de verre et l’ultracentrifugation des levures et la purification a été faite par chromatographie d’échange d’ions (DEAE-cellulose) suivie d’une chromatographie d’affinité (hydroxyapatite). La pureté de Hsp90 a été contrôlée par la SDS-PAGE et son identification a été réalisée par immunoblotting.RésultatsLes graphiques d’échange d’ions et d’affinité chromatographique ont montré un pic chez tous les isolats de C. albicans tant malaisiens qu’iraniens, les souris infectées et sous choc thermique haut (42 °C) et bas (25 °C). Dans l’immunoblotting, les fragments de Hsp90 ont été obtenus autour de 47, 75 et 82 kDa. La moyenne basse de Hsp90 était 0,350 et 0,240 mg/g pour les isolats malaisiens et iraniens à 25 °C, respectivement, alors que les moyennes de concentrations hautes de Hsp90 étaient 3,05 et 2,600 mg/g pour les isolats malaisiens et iraniens à 42 °C, respectivement. Il existait des différences quantitatives de Hsp90 entre les isolats malaisiens (1,01 ± 0,07 mg/g) et des reins de souris (1,23 ± 0,28 mg/g) aussi bien qu’entre les isolats iraniens (0,70 ± 0,19 mg/g) et des reins de souris (1,00 ± 0,28 mg/g) (p < 0,05).ConclusionLes résultats ont montré des différences dans toutes les situations évaluées: isolats iraniens et malaisiens, échantillons traités avec les températures (25 °C ou 42 °C) et avant ou après infection des souris (37 °C). Ils indiquent une plus haute virulence de cette espèce de levure dans les hautes températures pour l’homme et les modèles animaux.