Cryptoccocal meningitis in Yaoundé (Cameroon) HIV infected patients: Diagnosis, frequency and Cryptococcus neoformans isolates susceptibility study to fluconazole

SummaryCryptococcal meningitis is a mycosis encountered especially in patients with Acquired Immunodeficiency Syndrome and is fatal in the absence of treatment. Information on epidemiology, diagnosis and susceptibility profile to antifungal drugs, are scarce in Cameroon. Authors evaluated the diagnosis possibilities of the cryptococcal meningitis in Cameroon, and studied the antifungal susceptibility of isolated strains to fluconazole, used as first line treatment of the disease in Cameroon. Between December 2009 and July 2011, 146 cerebrospinal fluids obtained from HIV patients with suspicion of meningitis were analysed. The diagnosis procedure involved macroscopic and cyto-chemical analysis, India ink test, culture on Sabouraud chloramphenicol medium and antigen latex agglutination test. Antifungal susceptibility testing of isolated strains to fluconazole was done by the E-test® method. The diagnosis of cryptococcal meningitis gave 28.08% positive cases. Among these patients, 80% were at stages III and IV and 20% at stage I of the HIV infection, according to the WHO previous classification. Cyto-chemical analysis showed current findings in the case of cryptococcal meningitis. India ink test and latex agglutination test exhibited very high sensitivity and specificity (> 94%). Fluconazole antifungal susceptibility testing gave MICs lower than 32 μg/mL to 92.7% of isolated strains and MICs greater than this value to 7.3% of isolates. These results showed that cryptococcal meningitis remains a real problem among HIV infected patients in Yaoundé. The emergence of fluconazole reduced susceptibility strains is worrying. Nevertheless, efficacy of rapid detection tests is interesting because this will help in rapid diagnosis and treatment of patients.

RésuméLa cryptococcose neuroméningée est une mycose grave retrouvée chez les patients atteints du Sida. Elle est mortelle en absence de traitement. Il existe peu de données au Cameroun sur l’épidémiologie, le diagnostic et la sensibilité des souches isolées aux divers antifongiques et en particulier au fluconazole. Cette étude avait pour objectif d’évaluer les moyens diagnostiques de la cryptococcose neuro-méningée chez des patients VIH positifs et d’en établir la fréquence à Yaoundé. Le but était aussi d’étudier la sensibilité des souches isolées au fluconazole, utilisé en traitement de première ligne au Cameroun contre la cryptococcose. La période d’étude s’est étendue de décembre 2009 à juillet 2011 et a porté sur l’analyse de 146 liquides de ponction lombaire (LCR) : l’aspect, l’examen cyto-chimique, l’examen direct par le test à l’encre de Chine, la mise en culture à 37 °C pendant 2 à 14 jours sur milieu de Sabouraud chloramphénicol sans actidione. La recherche d’antigène cryptococcique par agglutination de particules de latex a été effectuée en parallèle. Par ailleurs, une fois le diagnostic de Cryptococcus neoformans posé, l’étude de la sensibilité au fluconazole de chaque isolat a été effectuée par la méthode du E-test®. L’ensemble de ces techniques a permis d’identifier 41 cas de méningites à cryptocoque soit une fréquence de 28,08 %. À l’examen macroscopique il n’y a pas de corrélation entre l’aspect du LCR et la présence ou non de C. neoformans. Une faible réaction cellulaire a été enregistrée, associée à une hypoglycorachie, une hyperprotéinorachie et une chlorurachie normale. Les tests de détection rapide de C. neoformans (encre de Chine et recherche d’antigène) ont des sensibilités et des spécificités élevées (> 94 %). Parmi les souches isolées, le fluconazole présente une CMI inférieure à 32 μg/mL pour 92,7 % de souches et une CMI supérieure cette valeur pour 7,3 % d’isolats. Ces résultats montrent que la cryptococcose neuro-méningée reste un problème sérieux de santé chez les patients VIH positifs à Yaoundé ; vu la fréquence élevée des infections, et l’émergence des souches à CMI élevée pour le fluconazole. Toutefois, l’efficacité des tests de détection rapide de C. neoformans est rassurante car cela permet l’instauration rapide du traitement ainsi qu’une meilleure prise en charge du patient.