In vitro antifungal activities of amphotericin B, 5-fluorocytosine, fluconazole and itraconazole against Cryptococcus neoformans isolated from cerebrospinal fluid and blood from patients in Serbia

SummaryRecently, geographic variations in resistance to agents commonly used in the treatment of cryptococcosis have been reported. Therefore, the antifungal susceptibilities of 31 clinical isolates of Cryptococcus neoformans, collected in Serbia during 10-year period, were investigated. Strains were isolated from cerebrospinal fluid (n = 28) and blood (n = 3), from patients with AIDS (n = 26), lymphoma (n = 4) and kidney transplant recipient (n = 1). The minimal inhibitory concentrations (MICs) of amphotericin B, 5-fluorocytosine, fluconazole and itraconazole were determined by the E-test® method. The isolates were highly susceptible to amphotericin B (100% susceptibility at MIC < 0.5 μg/mL) and 5-fluorocytosine (87.1% susceptibility at MIC ≤ 4 μg/mL). Geometric mean MIC of amphotericin B and 5-fluorocytosine were 0.102 μg/mL and 0.396 μg/mL, respectively. Fluconazole exhibited the lowest activity in vitro (48.4% susceptibility at MIC ≤ 8 μg/mL) with a significant resistance rate. The activity of itraconazole was also decreased (48.4% susceptibility at MIC ≤ 0.25 μg/mL). The geometric mean MIC of fluconazole stood at 15.14 μg/mL and of itraconazole was 0.144 μg/mL. Cross-resistance among azoles was not common (3.2%), but the parallel increase in fluconazole and itraconazole MIC has been observed (P < 0.01). The low rate of susceptibility to fluconazole stresses the need for active antifungal surveillance of C. neoformans and of the corresponding data from different geographic regions.

RésuméCes dernières années, on a remarqué des variations géographiques concernant la résistance aux antifongiques utilisés dans la thérapie de la cryptococcose. Pour cette raison, on a évalué la sensibilité de 31 isolats de Cryptococcus neoformans récoltés durant une période de dix ans en Serbie. Les souches ont été isolées du liquide cérébrospinal (n = 28) et du sang (n = 3) de patients atteints de sida (n = 26) ou de lymphome (n = 4) et un greffé de rein (n = 1). La concentration minimale inhibitrice (CMI) pour l’amphotéricine B, la 5-fluorocytosine, le fluconazole et l’itraconazole a été déterminée par la méthode du E-test®. Les isolats ont montré une haute sensibilité à l’amphotéricine B (sensibilité 100 %-MIC < 0,5 μg/mL) et à la 5-fluorocytosine (sensibilité 87,1 %-MIC ≤ 4 μg/mL). La moyenne géométrique de la CMI pour l’amphotéricine B et de la 5-fluorocytosine était de 0,102 μg/mL et 0,396 μg/mL respectivement). Le fluconazole a montré la plus basse activité in vitro (sensibilité 48,4 %-CMI ≤ 8 μg/mL) avec un important pourcentage de la résistance. L’activité de l’itraconazole, de même, était diminuée (sensibilité 48,4 %-CMI ≤ 0,25 μg/mL). La moyenne géométrique de la CMI pour le fluconazole était 15,14 μg/mL et pour l’itraconazole de 0,144 μg/mL. La résistance croisée entre les azolés n’était pas fréquente (3,2 %), mais l’augmentation parallèle de la CMI du fluconazole et de l’itraconazole a été observée (p < 0,01). Le faible taux de la sensibilité aux azolés souligne la nécessité d’une surveillance active de la sensibilité de C. neoformans aux antifongiques.