In vitro antimicrobial susceptibility of Prototheca spp. isolated from bovine mastitis in a Portugal dairy herd

ObjectiveTo test the in vitro susceptibility of Prototheca spp. associated with bovine mastitis in a dairy farm of Leiria, Portugal to antibacterial and antifungal drugs, in the aim of evaluating their antimicrobial resistance patterns and determining their susceptibility to disinfectants used in the dairy herd, in order to select the appropriate disinfectants, concentrations and exposure times.Material and methodsIn vitro antimicrobial susceptibility of 38 Prototheca spp. isolates was measured using the disk diffusion method. Fifteen antifungal and antibacterial antibiotics were evaluated. Isolates were tested to determine their sensitivity to five disinfectants used in this dairy herd with the membrane filtration method in accordance with the European norms NF EN 1040 and NF EN 1275.ResultsBased on morphological and biochemical properties, all Prototheca strains isolated in this study were assigned to the species Prototheca zopfii. All strains were shown to be in vitro resistant to penicillin, ampicillin, amoxicillin, neomycin, streptomycin, fluconazole, itraconazole, clotrimazole, econazole, and miconazole. All strains were susceptible to kanamicin and gentamicin. In addition, 77.8 and 44.4% were susceptible to ketoconazole and nystatin, respectively. Only 11.1% of the strains were sensitive to amphotericin B. Biocitro® and Eco Plus® proved to be efficient for all Prototheca strains. Combicid® and Prodip G® were not able to inhibit the growth of all Prototheca strains.ConclusionThis study recommends the use of a germicide, whose action against Prototheca spp. has also been demonstrated and at the recommended concentration and exposure time.

RésuméBut de l’étudeTester la sensibilité in vitro aux antibactériens et antifongiques de Prototheca sp. responsable de mammite bovine dans une exploitation laitière à Leiria, Portugal, afin d’évaluer son profil de résistance aux antimicrobiens et de déterminer sa sensibilité aux désinfectants utilisés dans l’exploitation afin de choisir les désinfectants, les concentrations et la durée d’exposition effectifs.Matériel et méthodesAu total, 38 isolats de Prototheca sp. ont été évalués. Les tests de sensibilité à 15 antifongiques et antibactériens antibiotiques ont été réalisés selon la méthode de diffusion de disques en milieu gélosé. Les tests de sensibilité à cinq désinfectants utilisés dans l’exploitation laitière ont été réalisés selon la méthode de filtration sur membrane en conformité avec les normes européennes NF EN 1040 et NF EN 1275.RésultatsSelon les caractères biochimiques et morphologiques observés, toutes les souches ont été identifiés à P. zopfii. Toutes les souches ont été résistantes à la pénicilline, ampicilline, amoxicilline, néomycine, streptomycine, fluconazole, itraconazole, clotrimazole, econazole et miconazole. Toutes les souches étaient sensibles à la kanamicine et à la gentamicine. En outre, 77,8 et 44,4 % ont été respectivement sensibles à la nystatine et au kétoconazole. Seulement 11,1 % des souches étaient sensibles à l’amphotéricine B. Biocitro® et Eco Plus® se révèle efficace sur toutes les souches de Prototheca et Combicid® et Prodip G® n’ont pas été capables d’inhiber la croissance de toutes les souches.ConclusionCette étude recommande l’utilisation d’un germicide que s’est avéré efficace sur Prototheca sp. en respectant la concentration et la durée d’exposition.