کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
6491530 | 43412 | 2014 | 7 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Reduced quenching and extraction time for mammalian cells using filtration and syringe extraction
ترجمه فارسی عنوان
زمان خشک کردن و استخراج برای سلول های پستانداران با استفاده از تصفیه و استخراج سرنگ کاهش یافته است
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
uridine-5′-diphosphateGTPguanosine-5′-monophosphateuridine-5′-triphosphateAMPUDP-GalGMPUMPADPUDP-GlcUDPUTPguanosine-5′-triphosphate - guanosine-5'-triphosphateadenosine-5′-triphosphate - آدنوزین 5'-تری فسفاتadenosine-5′-diphosphate - آدنوزین 5'-دی فسفاتadenosine-5′-monophosphate - آدنوزین 5'-مونوفسفرهATP - آدنوزین تری فسفات یا ATPMetabolite extraction - استخراج متابولیتGDP - تولید ناخالص ملیCHO cells - سلول های CHOMetabolomics - متابولومیکQuenching - کوئنچ کردنguanosine-5′-diphosphate - گوانوزین 5'-دی فسفات
موضوعات مرتبط
مهندسی و علوم پایه
مهندسی شیمی
بیو مهندسی (مهندسی زیستی)
چکیده انگلیسی
In this article, we describe and evaluate a two-step optimized protocol based on fast filtration by use of a vacuum pump for quenching and subsequent extraction of intracellular metabolites from CHO (Chinese hamster ovary) suspension cells, which uses commercially available components. The method allows transfer of washed cells into liquid nitrogen within 10-15Â s of sampling and recovers the entire extraction solution volume. It also has the advantage to remove residual filter filaments in the final sample, thus preventing damage to separation columns during subsequent MS analysis. Relative to other methods currently used in the literature, the resulting energy charge of intracellular adenosine nucleotides was increased to 0.94 compared to 0.90 with cold PBS quenching or 0.82 with cold methanol/AMBIC quenching.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Biotechnology - Volumes 182â183, 20 Julyâ10 August 2014, Pages 97-103
Journal: Journal of Biotechnology - Volumes 182â183, 20 Julyâ10 August 2014, Pages 97-103
نویسندگان
Juan A. Hernández Bort, Vinoth Shanmukam, Martin Pabst, Markus Windwarder, Laura Neumann, Ali Alchalabi, Guido Krebiehl, Gunda Koellensperger, Stephan Hann, Denise Sonntag, Friedrich Altmann, Christine Heel, Nicole Borth,