کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
10536796 | 962605 | 2015 | 8 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Multiple disulfide bridges modulate conformational stability and flexibility in hyperthermophilic archaeal purine nucleoside phosphorylase
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
MTAHyperthermophilic enzymes5′-deoxy-5′-methylthioadenosine[θ]NDSBMOPSPDIPNPAdoMetGdmCl3-(N-morpholino) propanesulfonic acid - 3- (N-مورفولینو) پروپان سولفونیک اسیدS-adenosylmethionine - اس-ادنوزیل متیونینsodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدSDS-PAGE - الکتروفورز ژل پلی آکریل آمیدcircular dichroism - رنگ تابی دورانیProtein thermostability - مقاوم در برابر پروتئینLimited proteolysis - پروتئولیت محدودDisulfide bridges - پلهای سولفیدPurine nucleoside phosphorylase - پورین نوکلئوزید فسفوریلاDifferential scanning calorimetry - کالریمتری روبشی افتراقیguanidinium chloride - گوانیدین کلرید
موضوعات مرتبط
مهندسی و علوم پایه
شیمی
شیمی آنالیزی یا شیمی تجزیه
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
5â²-Deoxy-5â²-methylthioadenosine phosphorylase from Sulfolobus solfataricus is a hexameric hyperthermophilic protein containing in each subunit two pairs of disulfide bridges, a CXC motif, and one free cysteine. The contribution of each disulfide bridge to the protein conformational stability and flexibility has been assessed by comparing the thermal unfolding and the limited proteolysis of the wild-type enzyme and its variants obtained by site-directed mutagenesis of the seven cysteine residues. All variants catalyzed efficiently MTA cleavage with specific activity similar to the wild-type enzyme. The elimination of all cysteine residues caused a substantial decrease of ÎHcal (850 kcal/mol) and Tmax (39 °C) with respect to the wild-type indicating that all cysteine pairs and especially the CXC motif significantly contribute to the enzyme thermal stability. Disulfide bond Cys200-Cys262 and the CXC motif weakly affected protein flexibility while the elimination of the disulfide bond Cys138-Cys205 lead to an increased protease susceptibility. Experimental evidence from limited proteolysis, differential scanning calorimetry, and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis under reducing and nonreducing conditions also allowed to propose a stabilizing role for the free Cys164.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics - Volume 1854, Issue 10, Part A, October 2015, Pages 1458-1465
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics - Volume 1854, Issue 10, Part A, October 2015, Pages 1458-1465
نویسندگان
Maria Libera Bagarolo, Marina Porcelli, Elisa Martino, Georges Feller, Giovanna Cacciapuoti,