کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
5822052 | 1557826 | 2015 | 8 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
A dark-to-bright reporter cell for classical swine fever virus infection
ترجمه فارسی عنوان
یک سلول خبرنگار تیره به روشن برای عفونت ویروس کبد خوک
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
PRRSVPK-15PHEVReal-Time Reverse Transcription PCRTCID50CSFVPCV2RT-PCRhpieGFPORFPBSDMEMPRV50% tissue culture infective dose - 50٪ کشت بافت آلودگیRNA - اسید ریبونوکلئیکribonucleic acid - اسید ریبونوکلئیکELISA - تست الیزاEnzyme-linked immunosorbent assay - تست الیزاPorcine circovirus - دیرو ویروس گوشت خوکreverse transcription PCR - رونویسی معکوس PCRReal-time RT-PCR - زمان واقعی RT-PCRhours post-inoculation - ساعت پس از تلقیحFluorescence intensity - شدت فلورسانسnonstructural protein - غلظت پروتئینPhosphate buffered saline - فسفات بافر شورopen reading frame - قاب خواندن بازDulbecco’s modified eagle’s medium - محیط عقاب اصلاح شده DulbeccoUTR یا untranslated regions - منطقه ترجمه نشدهuntranslated region - منطقه غیر ترجمهpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازPseudorabies virus - ویروس PseudorabiesPorcine reproductive and respiratory syndrome virus - ویروس سندرم تولید مثل و تنفسیClassical swine fever virus - ویروس کبد خوکenhanced green fluorescent protein - پروتئین فلورسنت سبز افزایش یافته است
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
ایمنی شناسی و میکروب شناسی
ویروس شناسی
چکیده انگلیسی
Current methods to quantitate classical swine fever virus (CSFV) infectivity in cell culture are time-consuming and labor-intensive. This study described the generation of a dark-to-bright fluorescent reporter cells to facilitate in vitro studies of CSFV infection and replication. This assay was based on a novel reporter cell stably expressing the enhanced green fluorescent protein (EGFP) fused in-frame to a quenching peptide via a special recognition sequence of the CSFV NS3 protease. Chromophore maturation of EGFP can be prevented by quenching peptide until the quenching peptide was specifically cleaved by NS3 protease during CSFV infection, making it a dark-to-bright reporter of CSFV infection. The result demonstrated that the CSFV-infected cells were clearly distinguishable from mock-infected cells and cells infected with other viruses. There was a strong correlation between the fluorescence intensity and viral RNA replication in CSFV-infected cells. The cell enabled rapid and sensitive detection of CSFV infection and viral replication in cell culture. The best time to examine the fluorescence in CSFV-infected cells was at 48Â h post-inoculation. These data suggested that the cells can be used as a reporter cell in CSFV infection assays. This reporter cell provides a sensitive method for the detection and isolation of CSFV and it will be useful for the screening of antiviral drugs or neutralizing antibody assays.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Antiviral Research - Volume 117, May 2015, Pages 44-51
Journal: Antiviral Research - Volume 117, May 2015, Pages 44-51
نویسندگان
Fuwang Chen, Xin Yang, Daxing Pang, Zhiyuan Peng, Teng Ma, Hongsheng Ouyang, Linzhu Ren,