کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
6490313 | 1416969 | 2018 | 9 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Efficient production of human goose-type lysozyme 2 in the methylotrophic yeast Pichia pastoris
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
PBSYPdAOX1MOPSBMMYBMGYRP-HPLCRT-PCRPNAGAPDHDPPHMALDI-TOF3-(N-morpholino) propanesulfonic acid - 3- (N-مورفولینو) پروپان سولفونیک اسیدBSA - BSALC–MS - LC-MSp-Nitroanilide - p-nitroanilidebovine serum albumin - آلبومین سرم گاوSDS-PAGE - الکتروفورز ژل پلی آکریل آمیدSodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل پلی اتیل آمید سدیم دودسیل سولفاتdissolved oxygen - اکسیژن محلولbuffered methanol-complex medium - بافر متانول پیچیده محیطFermentation - تخمیر Liquid chromatography mass spectrometry - طیف سنجی جرمی کروماتوگرافی مایعyeast extract peptone dextrose - عصاره مخمر پپتون دگزستروزPhosphate buffered saline - فسفات بافر شورLytic activity - فعالیت جنسیGoose-type lysozyme - لیزوزیم گوز نوعbuffered glycerol-complex medium - محیط پیچیده گلیسرول بافرpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازPichia pastoris - پیکیا پاستوریسoptical density - چگالی نوریReverse-phase high performance liquid chromatography - کروماتوگرافی مایع با کارایی معکوس فاز
موضوعات مرتبط
مهندسی و علوم پایه
مهندسی شیمی
بیو مهندسی (مهندسی زیستی)
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Infectious diseases caused by antibiotic multidrug-resistant microorganisms are major causes of morbidity and mortality in humans. Hence, there is an urgent need to search for new antimicrobial agents. Initially known as a defensive effector in the innate immunity of certain organs of the human body, human goose-type lysozyme 2 (hLysG2) has been shown to possess therapeutically useful potential against multidrug-resistant microorganisms. Developing a novel strategy for large-scale production that provides high yields of this protein with high purity, quality, and potency is critical for pharmaceutical applications. To overcome the issues related to prokaryotic expression, here we report the production of recombinant hLysG2 (rhLysG2) using the methylotrophic yeast Pichia pastoris as expression host. The strong inducible alcoholoxidase 1 (AOX1) promoter was used to drive expression of the optimized hLysG2 gene. Under the optimal expression conditions, the lytic activity of rhLysG2 reached 113 U/mL of culture supernatant in shake flask cultivation and this was increased to 2084 U/mL in fed-batch fermentation. Using chitin affinity chromatography and size-exclusion chromatography, rhLysG2 was produced with a yield of 137â¯mg/L, purity ofâ¯>â¯99%, molecular weight of 21,504.6â¯Da, and specific activity of 13,500â¯U/mg. In vitro assays indicated that rhLysG2 possessed muramidase activity, isopeptidase activity, and free radical scavenging activity. This report describes an efficient strategy for the production of biologically active rhLysG2 in P. pastoris on a large scale with a high yield, which provides a solid foundation for possible future pharmaceutical applications.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Biotechnology - Volume 275, 10 June 2018, Pages 44-52
Journal: Journal of Biotechnology - Volume 275, 10 June 2018, Pages 44-52
نویسندگان
Peng Huang, Qingwen Sun, Weijun Shi, Wangchun Du, Xue Li, Ning Zhang,