دانلود مقالات ISI درباره دی‌ان‌ای مکمل، DNA مکمل + ترجمه فارسی

DNAی مکمل یا cDNA مولکولهای DNA یی هستند که از طریق رونویسی معکوس mRNA ساخته می شوند و بنابراین فاقد اینترون هایی هستند که در DNA ژنومی وجود دارد. کتابخانه DNA مکمل، حاوی نسخه های کلون شده cDNA از همه mRNA یک سلول یا بافت خاص است. DNA های مکمل کلون شده، بر خلاف کلون DNA ژنومی فقط شامل توالی رمز گذار پروتئین هستند و فاقد اینترون ها، توالی های تنظیمی ژن وپروموتورها هستند. بنابراین زمانی که قرار است ژن کلون شده ای به منظور تولید پروتئین بیان شود، این کلون ها بسیار سودمند هستند. همانطور که گفته شد DNA ای که وارد کتابخانه cDNA می شود. سنتز DNA مکمل: هرچند مکانیسم‌های متعددی جهت سنتز DNA ی مکمل پیشنهاد شده‌است ولی سنتز آن از روی RNAی پیامبر بالغ، با بهره گیری از آنزیم رونوشت بردار معکوس، رایج‌ترین روش جهت تهیّه آن است. آنزیم ونوشت بردار معکوس ضمن حرکت در امتداد رشته mRNAی بالغ، دئوکسی ریبونوکلئوتید مکمل هریک از ریبونوکلئوتیدهای mRNA را از طریق برقراری پیوند هیدروژنی مقابل هم قرار می‌دهد و ضمن تشکیل یک رشته هیبرید نهایتاً منجر به سنتز cDNA می‌گردد. تهیّه cDNA ی یوکاریوتی که فاقد توالی‌های اینترون است، شامل مراحل زیر می‌باشد: در مرحله نخست سلول یوکاریوتی با بهره گیری از سامانه رونویسی از روی رشته DNA، RNA ی پیامبر نابالغ را رونویسی می‌کند. طی فرآیند مشابهی در سلولهای یوکاریوتی، پس از حذف رونوشت‌های اینترون و بلوغ mRNA یک دُم پلی آدنین و کلاهک ۵'-متیل گوانیدین به رشته mRNA افزوده می‌شود. این ترکیب از رشته‌های RNA ی پیامبر بالغ، از سلول یوکاریوتی استخراج می‌گردد. در مرحله چهارم پرایمری از پلی تیمیدین در مقابل دُم پلی آدنین از طریق برقراری پیوند هیدروژنی هیبرید می‌گردد. (البته در این مرحله از هر هگزامری با توالی اتّفاقی که بتواند با ناحیه‌ای از mRNA هیبرید گردد، می‌توان استفاده نمود). آنزیم رونوشت بردار معکوس جهت فعّالیت به این قطعه به عنوان پرایمر نیازمند است. ساختار تهیّه شده در مرحله قبل در معرض فعّالیت آنزیم رونوشت بردار معکوس قرار می‌گیرد.